干细胞
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脐带血干细胞治疗肝硬化的理论基础

时间:2019-07-03 09:22来源: 未知 作者:admin 点击:

失代偿期肝硬化目前临床上缺乏特异的治疗方法,主要是给予放腹水、输蛋白等对症支持治疗。虽然肝脏移植为部分患者带来希望,但由于肝脏供体来源有限,手术复杂,而且移植费用昂贵,移植后需要长期应用抗排异药物等原因,绝大部分患者都没有条件接受肝脏移植手术,最后常死于肝功能衰竭等严重并发症。因此,如何改善终末期肝病患者肝脏功能,成为临床研究难点和重点。近年来,干细胞研究为肝功能衰竭患者的治疗提供了新思路,有报道骨髓和脐带血干细胞在体内外可以分化为功能完备的肝细胞,干细胞替代成熟肝细胞治疗肝病,有望使细胞治疗在肝病应用方面取得突破。
 
但是选择什么样来源的干细胞,怎么样有效获得存活率好的干细胞,用什么途径将干细胞移植到受损的组织器官,是临床上需要探索的问题。本章将对上述问题做进一步探讨。
 
一、干细胞治疗失代偿期肝硬化要解决的问题

干细胞治疗失代偿期肝硬化是指医师可以用结构和功能正常的细胞作为“药物”输给患者,以修复受损硬化的肝组织,改善肝功能,达到改善患者- -般状况的目的,起到临床治疗疾病作用。
 
二、干细胞治疗失代偿期肝硬化选择哪种细胞来源

骨髓、脐带血、外周血干细胞都可以选择。骨髓可以采集于患者自体,也可采取异体捐赠方式。脐带血可以采取捐赠方式获得。骨髓、脐带血、外周血干细胞的比较,可以说明:骨髓中的干细胞比外周血的干细胞更为原始。脐带血比骨髓更为原始。脐带血的干细胞自我繁殖能力最强,繁殖速度最快,骨髓次之,外周血最差。脐带血中干细胞的比率最大,骨髓次之,外周血最低。外周血中的干细胞更接近终端细胞或称祖细胞或前体细胞。因此,如果条件允许,首选用脐带血干细胞
 
三、干细胞治疗肝硬化是否要做HA配型

异体骨髓移植必须做HLA配型。异体骨髓做局部细胞治疗时,有不做HLA配型,也有做的报道。脐带血干细胞在做移植时,也是必须做HLA配型。HLA半相合移植成功率远高于骨髓。因为: 1)脐带血干细胞比骨髓更原始; 2)脐带血干细胞表面抗原性远比骨髓弱。脐带血干细胞在用做细胞治疗时可以忽略HLA配型问题,就如同临床上输血一样,不用做HLA配型。原因: 1)脐带血干细胞的表面抗原性很弱,弱到不被受体的免疫系统识别; 2)用于细胞治疗的脐血干田胞不替代原有的组织器官,原有的组织器官还在起作用。
 
四、如何选择分离提取干细胞的方法

获取高纯度、存活率良好的干细胞/祖细胞是关键。

骨髓、脐带血有核细胞体外分离试剂盒是专门用于临床分离骨髓和脐带血中有核细胞的,其重要成分为蛋白酶和无机盐离子组成,是一种新型而简便的富集高纯度干细胞的方法,是世界上分离、纯化干细胞最优化的方法之一。其原理是以蛋白酶选择性地与非靶细胞结合,使非靶细胞表面活性发生变化,细胞密度发生了变化,通过密度梯度离心的方法分离获得所需的靶细胞,由于是负筛选,所以收集的靶细胞没有任何标记。个试剂盒设计分离200ml骨髓或200ml脐带血,能有效除去全部红细胞、血小板及除去全部血浆物质, LIN抗体阴性只回收有核细胞,分离纯化后的有核细胞回收率85%以上,细胞存活率98%以上,不损伤干细胞,干细胞表面无任何标记物,能完整地保持干细胞原有的生物学活性。
 
目前市场上有几种分离提取干细胞的方法,经过筛选我们选择负收集混合法,所用的是一种现成经国家药检部门正式批准的商品化的试剂,同时可以分离纯化骨髓和脐带血的“骨髓、脐带血干细胞/祖细胞体外分离试剂盒”。该试剂盒的设计适合我们临床的需求:干细胞/祖细胞的回收率>85%;分离提取的干细胞/祖细胞存活率>96%;分离、纯化过程能有效保留全部种类的干细胞/祖细胞。试剂盒能有效除去全部的红细胞、血小板、血浆物质,能除去绝大部分成熟的白细胞、淋巴细胞。

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